Введение

Самостоятельная чистка съемных пластмассовых протезов пациентами является важной составляющей частью обеспечения гигиены полости рта и предотвращения развития возможных заболеваний полости рта. Но в таком, казалось бы, обыденном вопросе на удивление нет консолидированного мнения даже среди практикующих передовиков стоматологической науки. Рекомендации по методу очищения протезов отличаются не только предметами, но и средствами гигиены. Так, некоторые авторы [Трезубов и др., 2019] предлагают ухаживать за съемными зубными протезами с помощью зубной щетки с использованием пасты, а также применять специальные таблетки для очистки протезов. Другие же [Лебеденко и др., 2020] предлагают метод гигиенического ухода при помощи зубной щетки и полоскания в теплой воде. Туалет протеза при помощи мыльной воды предложен М.Л. Мироновой [Миронова, 2021]. Из обнаруженного разночтения следует, что у врачей нет до конца сформированного однозначного понимания связи методов гигиенического ухода за съемными зубными протезами с их влиянием на микробиоценоз поверхности протезов, что может сказываться на состоянии здоровья пациентов [Македонова, 2020; Нурбаев, 2020; Молоданова, 2021; Митрофанов и др., 2022].

Цель работы – провести анализ адгезии микроорганизмов к поверхности съемных пластмассовых зубных протезов в зависимости от метода их чистки для определения оптимального метода гигиенического ухода за протезом.

Объекты и методы исследования

В качестве материала были использованы блоки из базисной акриловой стоматологической пластмассы, так как на основании данных литературы [Миняйло, 2019], а также статистики по обращаемости [Кошелев и др., 2018, 2020; Qureshi, 2022] установлено, что более 50 % всех изготавливаемых съемных протезов содержат в той или иной форме базисную пластмассу [Миняйло, 2019]. Также известно, что поверхность пластмассы среди всех остальных конструкционных материалов зубных протезов является наиболее благоприятной для колонизации микроорганизмами, даже при условии тщательной полировки [Зверева и др., 2022].

Для изготовления блоков использовали базисный воск, из которого вырезали блоки размером 5×5 см, в последующем склеив их между собой для получения толщины в 6 мм. Далее с блока был снят оттиск, по которому производилось дублирование до получения 10 восковых блоков. Потом производилась замена воска на пластмассу горячей полимеризации, а поверхность блока отполирована в соответствии со стандартами [Миронова, 2022].

После выполнялось моделирование условий эксплуатации и чистки съемных зубных протезов различными способами. Для этого использовались чашки Петри, раствор натрия хлорида 0,9 %, нагревательный коврик, имитирующий термостат и регулятор Техметр ЦКТ-1, который поддерживал температуру на необходимом уровне (36.6 °C) на протяжении всего исследования. На основании данных профильной литературы [Трезубов и др., 2019; Каливраджиян и др., 2020; Миронова, 2021; Ушаков, 2022 и др.] были определены основные рекомендуемые методы очистки съемных зубных протезов и воспроизведены в эксперименте. На основании данных литературы, в среднем пациент, пользующийся съёмным протезом, тратит 1 минуту в день на его гигиену [Liu, 2022]. Соответственно, на протяжении 49 дней проводилась чистка каждой поверхности блока по 7,5 минут в день для имитации очищения протеза в течение года. Подобной методике «состаривания» были подвергнуты все блоки, кроме контрольных, обработка которых не проводилась.

Были пронумерованы необходимые 14 поверхностей блоков и применены последовательно основные методы чистки съемных протезов.

На блоках № 1, 2, и 3 использовали чистку при помощи мыльной воды, на блоках № 4, 5, 6 применяли чистку с помощью гигиенической зубной пасты, на блоках № 7, 8, 9 – отбеливающую зубную пасту, а на блоках № 10, 11, 12 – таблетки для очищения зубных протезов. Блок 13 – контрольный, находящийся в сухой чашке Петри. Блок 14 также являлся контрольным, но был помещен в чашку Петри с раствором натрия хлорида.

Были выбраны следующие предметы гигиены для очистки блоков:

– мануальная зубная щетка со средней степенью жесткости щетины (для блоков № 1, 3, 7 и 10);

– электрическая зубная щетка со средней степенью жесткости щетины (для блоков 2, 4, 8 и 11);

– ультразвуковая зубная щетка со средней степенью жесткости щетины DuPont Nylon (для блоков 3, 5, 9 и 12).

Для воспроизведения в эксперименте основных рекомендуемых методов очистки съемных зубных протезов выбрали средства гигиены, указанные в таблице 1.

Таблица 1
Table 1

Характеристика используемых средств гигиены
Characteristics of the hygiene products used

Для анализа адгезии микроорганизмов к поверхности съемных зубных протезов в зависимости от метода их чистки была использована методика оценки первичной адгезии микроорганизмов с ультразвуковой обработкой по В.Н. Цареву [Царев, 2021]. Был уменьшен размер блоков до 2,5×1,3 см, с этой целью вырезали необходимые части блоков при помощи стоматологического сепарационного диска, а затем повторно отшлифовывали и отполировывали поверхности, не подвергавшиеся чистке в соответствии со стандартами [Миронова, 2022]. Для экспериментального исследования in vitro использовались производственные штаммы Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Streptococcus pyogenes ATCC 2696 из государственной коллекции патогенных микроорганизмов ГИСК им. Л.А. Тарасевича. В первую очередь выбор микроорганизмов был основан на данных о нормобиоте полости рта, представителями которой являются стрептококки и стафилококки, патогенность которых зависит от их видов и их факторов патогенности. Что касается непатогенной кишечной палочки, не являющейся основной нормобиотой, то ее выбор основан на сравнении адгезии к поверхности протезов не только грамположительных (Staphylococcus aureus, Streptococcus pyogenes), но и грамотрицательных микроорганизмов (Escherichia coli). А также каждый из данных микроорганизмов имеет различное клеточное строение, что влияет не только на степень их адгезии, но и на факторы патогенности, что важно для понимания клинических проявлений того или иного заболевания.

Согласно алгоритму, образцы очищенных блоков внесли в бактериальную взвесь стандартного объема (0,5 по McFarland или 108 КОЕ/мл) и выдержали в ней при температуре 37 °C в течение 40 мин. Далее выполнили 5-кратное промывание блоков стерильным физиологическим раствором для удаления неадгезировавшихся микроорганизмов. Далее образцы блоков поместили в стерильную полужидкую транспортную среду в ультразвуковую ванночку, что позволило перевести во взвешенное состояние микробные клетки, вступившие в процесс первичной адгезии с поверхностью базисного материала. Затем провели высев микроорганизмов на плотную питательную среду с последующей инкубацией в течение 24 ч. при температуре 37 °C. После инкубации определили культуральные, морфологические, тинкториальные свойства микроорганизмов по традиционной методике, а также произвели подсчёт числа колониеобразующих единиц (КОЕ) каждого типа колоний и пересчёт КОЕ на 1 мл исследуемого материала. После провели статистическую обработку полученных результатов. Для статистической обработки нами был применен параметрический метод Краскелла – Уоллиса, который основан на проверке равенства медиан нескольких выборок. Данный критерий является ранговым и является инвариантным по отношении к любому монотонному преобразованию шкалы измерения.

Результаты исследования

Результаты количественного выражения микроорганизмов по отношению к используемым методам чистки выражены в таблице 2.

Таблица 2
Table 2

Количество микроорганизмов в зависимости от использованных методов чистки
Number of microorganisms depending on the cleaning methods used

Окончание табл. 2

Рис. 1. Распределение степеней адгезии Staphylococcus aureus к поверхности блоков
при использовании различных средств гигиены

Fig. 1. Distribution of the degrees of Staphylococcus aureus adhesion to the surface
of the blocks when using various hygiene products

Рис. 2. Распределение степеней адгезии Streptococcuspyogenes к поверхности блоков
при использовании различных средств гигиены

Fig. 2. Distribution of the degrees of Streptococcus pyogenes adhesion to the surface
of the blocks when using various hygiene products

Рис. 3. Распределение степеней адгезии Escherichia coli к поверхности блоков при использовании
различных средств гигиены

Fig. 3. Distribution of the degrees of Escherichia coli adhesion to the surface
of the blocks when using various hygiene products

Таблица 3

Table 3

Распределение степеней адгезии различных видов микроорганизмов к поверхности блоков
при использовании различных средств гигиены

Distribution of degrees of adhesion of various microorganism types to the surface of blocks
when using various hygiene products

Таблица 4
Table 4

Распределение степеней адгезии Staphylococcusaureus ATCC 25923 к поверхности блоков
при использовании различных средств гигиены

Distribution of the degrees of Staphylococcus aureus ATCC 25923 adhesion to the surface
of the blocks when using various hygiene products

Рис. 4. Распределение степеней адгезии Staphylococcus aureus к поверхности блоков
при использовании различных предметов гигиены

Fig. 4. Distribution of the degrees of Staphylococcus aureus adhesion to the surface
of the blocks when using various hygiene items

Рис. 5. Распределение степеней адгезии Streptococcus pyogenes к поверхности блоков
при использовании различных предметов гигиены

Fig. 5. Distribution of the degrees of Streptococcus pyogenes adhesion to the surface
of the blocks when using various hygiene items

Рис. 6. Распределение степеней адгезии Escherichia coli к поверхности блоков при использовании различных предметов гигиены

Fig. 6. Distribution of the degrees of Escherichia coli adhesion to the surface
of the blocks when using various hygiene items

Таблица 5
Table 5

Распределение степеней адгезии различных видов микроорганизмов к поверхности блоков
при использовании различных предметов гигиены

Distribution of the degrees of adhesion of various microorganism types to the surface of blocks
when using various hygiene items

Таблица 6
Table 6

Распределение степеней адгезии различных видов микроорганизмов к поверхности блоков
при использовании различных предметов гигиены

Distribution of the degrees of adhesion of various microorganism types to the surface of blocks
when using various hygiene items

Как следует из рис. 1, 2, 3, табл. 3, наблюдаются статистически значимые различия в распределениях по количеству Staphylococcus aureus ATCC 25923 в зависимости от использования различных средств гигиены. Уровень статистической значимости по тесту Краскелла – Уоллиса составил 0,048. Наблюдаются статистически значимые различия в распределениях по количеству Staphylococcus aureus ATCC 25923 в зависимости от использования различных предметов гигиены (рис. 4, 5, 6, табл. 5). Уровень статистической значимости по тесту Краскелла – Уоллиса составил 0,037. Наблюдаются статистически значимые различия в распределениях по количеству Streptococcus pyogenes ATCC 2696 в зависимости от использования различных предметов гигиены (рис. 4, 5, 6, табл. 5). Уровень статистической значимости по тесту Краскелла – Уоллиса составил 0,006. Наблюдаются статистически не значимые, но имеющие тенденцию к статистической значимости различия в распределениях по количеству Escherichia coli ATCC 25922 в зависимости от использования различных предметов гигиены (рис. 3, 4, 5, табл. 5). Уровень статистической значимости по тесту Краскелла – Уоллиса составил 0,069. Как следует из рис. 1, табл. 3, наблюдаются статистически не значимые различия в распределениях по количеству Streptococcus pyogenes ATCC 2696 и Escherichia coli ATCC 25922 в зависимости от используемых средств гигиены. Уровни статистической значимости по тесту Краскелла – Уоллиса составили 0,3 и 0,28 соответственно.

Обсуждение

При исследовании 3-х предметов гигиены для очистки блоков, сделанных из пластмассовых зубных протезов, выявлена статистически значимая высокая степень адгезии всех тестовых штаммов микроорганизмов при использовании мануальной зубной щетки по сравнению с контрольным блоком. Степень адгезии при использовании мануальной зубной щетки по сравнению со степенью адгезии микроорганизмов при использовании электрической зубной щетки оказалась в 1,173 раза больше. В это же время степень адгезии микроорганизмов при использовании ультразвуковой зубной щетки оказалась меньше в 1,183 раза, сравнивая со степенью адгезии при использовании мануальной зубной щетки. Это подтверждает факт того, что данная щетка является наименее эффективным предметом гигиены съемных протезов [Разумова и др., 2023; Chen, 2019]. Возможно, это связано с большей площадью головки мануальной зубной щетки и техники, отличающейся от техники чистки при использовании электрической и ультразвуковой зубной щетки. Данные явления могут привести к появлению большого количества микроабразий на поверхности протеза, к которым хорошо адгезируются микроорганизмы [Зверев и др., 2022]. Полученные данные дополняют данные литературы [Левинсон, 2020]. Использование ультразвуковой зубной щетки статистически достоверно эффективнее других предметов гигиены при изучении адгезии Streptococcuspyogenes и Escherichiacoli. Рассматривая увеличенную степень адгезии Streptococcuspyogenes при использовании мануальной зубной щетки, можно отметить осложнения от смещения нормы количества данных микроорганизмов, в особенности условно-патогенных для человека стрептококков Streptococcuspyogenes, которые могут вызывать у человека гнойные инфекции кожи, дыхательных путей, почек и других органов [Зверев и др., 2022].

Использование для очистки блоков мыльной воды характеризовалось увеличением степени адгезии Staphylococcusaureus, но уменьшением степени адгезии Streptococcuspyogenes и Escherichiacoli независимо от предмета гигиены. Стафилококки являются облигатными микроорганизмами полости рта здорового человека, однако увеличение их количества может способствовать возникновению воспалительных заболеваний полости рта, например, язвенного стоматита, проявляющегося покраснением слизистой оболочки полости рта, отеками с формированием участков эрозий, язв или пузырьковых высыпаний. Поскольку стафилококки, как и другие условно-патогенные микроорганизмы, не обладают органным тропизмом, они могут вызывать воспалительные процессы в различных органах. Степень адгезии при применении электрической зубной щетки оказалась в 1,001 раз больше, чем при применении ультразвуковой зубной щетки. Соответственно, при статистическом анализе выявлено, что мануальная зубная щетка обладает наименьшей эффективностью по параметру адгезии рассмотренных нами микроорганизмов к поверхности зубного протеза, а ультразвуковая зубная щетка, наоборот, максимальной эффективностью. Данное сравнение в доступной нам профильной литературе обнаружить не удалось, так как подобный эксперимент ранее не проводился.

По данным литературы, использование зубных паст является актуальным методом гигиенического ухода за съемными пластмассовыми протезами [Bhandari, 2021]. Исследование степени адгезии тестовых штаммов микроорганизмов при использовании гигиенической и отбеливающей зубной пасты не выявило статистической значимости, однако наблюдается разница в наиболее адгезировавшихся видах микроорганизмов. Так, при использовании гигиенической зубной пасты, независимо от вида зубной щетки, обнаружена степень адгезии Streptococcuspyogenes 5*10¹ КОЕ/мл – 7*10¹ КОЕ/мл и Escherichiacoli от 0 до 6*10¹ КОЕ/мл, однако использование данной пасты с ультразвуковой зубной щеткой выявило, что степень адгезии Staphylococcusaureus превышала таковую в 1,25 раза, чем при применении электрической. При анализе данных доступной литературы подобное сравнение не обнаружено.

При использовании отбеливающей зубной пасты, независимо от предмета гигиены, обнаружена высокая в сравнении с блоком контроля степень адгезии Escherichiacoli (1*10⁰ КОЕ/мл – 5*10⁰ КОЕ/мл) вместе с незначительной степенью адгезии Streptococcuspyogenes и Staphylococcusaureus (5*10¹ КОЕ/мл – 7*10¹ КОЕ/мл; 1,8*10² КОЕ/мл – 1,5*10³ КОЕ/мл соответственно). Кишечная палочка является частью непостоянной микробиоты ротовой полости. Носительство кишечной палочки может быть бессимптомным и не приводить к возникновению патологических процессов в организме. Однако определенные условия могут способствовать увеличению количества кишечной палочки, что может привести к возникновению различных форм инфекционных заболеваний [Царев, 2021]. Применение мануальной зубной щетки характеризовалось сниженной степенью адгезии в 2,294 раза и 2,095 раза по сравнению с электрической и ультразвуковой зубной щеткой соответственно. При этом разница адгезии при применении электрической зубной щетки и ультразвуковой оказалась в 1,114 раз больше при использовании первой.

По данным авторов, применение таких средств гигиены, как антисептические растворимые таблетки, при уходе за съемными зубными протезами позволяет существенно улучшить гигиеническое состояние полости рта [Шевкунова, 2017]. Использование таблеток для очищения съемных зубных протезов характеризовалось наименьшей степенью адгезии Staphylococcusaureus и Streptococcuspyogenes в сравнении с блоком контроля, но увеличением степени адгезии Escherichiacoli. Уменьшение степени адгезии Staphylococcusaureus и Streptococcuspyogenes с одновременным увеличением адгезии Escherichiacoli.

Выводы

Для предотвращения адгезии на поверхности съемного пластмассового протеза всех рассмотренных видов микроорганизмов среди предметов гигиены оптимальным вариантом является ультразвуковая зубная щетка, а среди средств гигиены наименьшую степень адгезии микроорганизмов удалось выявить при использовании таблеток для очищения протезов, однако с их использованием стоит совмещать и другие средства гигиены, например, мыло или гигиеническую зубную пасту.

Следует отметить, что для определения оптимального метода ухода за пластмассовой поверхностью съемных протезов с точки зрения микробиологического баланса требуется не только анализ количества и видов адгезировавшихся микроорганизмов, но и исследование количества и степени выраженности микроабразий на поверхности протеза. Также важно определить, какой из методов хранения съемных протезов в ночное время оптимален, так как в этом вопросе мнения экспертов тоже зачастую расходятся. Эти вопросы претендуют стать объектами дальнейшего изучения затронутой тематики.